蘋果的組織培養是采用無菌培養技術，將來自優良植物的莖尖、腋芽、葉片、鱗片、塊根和球莖等器官以及它們的組織切片進行離體培養，使之在短期內獲得大量遺傳性一致的個體的方法。由于離體技術處理嚴格，所以很容易脫除一些細菌病原及病毒，是復壯品種的有效措施。已成功脫除的病毒和病害有蘋果褪綠葉斑病毒、花葉病病毒、輪紋病等。蘋果矮化砧、抗寒砧的組織培養也已成功。蘋果脫毒組培技術流程具體如下。
一、外植體材料選擇與處理
早春，將上年芽接或切接的盆栽長富2號蘋果苗移人溫室，待新梢長出3～5片新葉時，放入熱處理箱中，37℃恒溫熱處理30 d或32℃與37℃每8 h變換一次，變溫熱處理60 d。脫毒率可達80％以上。熱處理結束后，從盆栽苗嫩梢上采集生長旺盛、長約2～3cm頂梢，流水沖洗10min，去掉小葉。70％乙醇浸泡30s，蒸餾水沖洗后放入0.1％ HgCI中消毒10min，無菌水沖洗3～5次，解剖鏡下迅速剝取1.0 mm的莖尖進行分離培養，接種于起始培養基上。
二、培養基制備
1.1 芽誘導
適宜蘋果芽誘導培養基為：MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L。誘導的芽生長正常可發育成新梢。
1.2 繼代培養
選擇誘導的芽叢切割成單芽莖段，轉接于設計的繼代培養基上。適宜的蘋果繼代培養基為：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖4％+瓊脂0.36mg/L。培養條件：光照強度2000～2500lx，光照時間14～16 h/d，適宜溫度為25℃±2.0℃。40 d后增殖6.1倍。
1.3 生根培養
選擇生長正常的繼代培養苗，剪成單芽莖段，插入生根培養基中，蘋果適宜的生根培養基為：1／2MS+IAA1.5mg/L+蔗糖25％+瓊脂0.36％。培養30d后，平均4～6條根／苗，長達0.5～1.0cm。根白且粗，多直接生于莖基部。
三、培養條件
溫度26～30℃，光照強度1500～2000 LX，10 h/d。
四、煉苗、移栽
強光閉瓶鍛煉生根苗20～25 d，不定根長至1 cm時，將培養瓶移至自然強光下，不去封口膜繼續培養20 d左右，使試管苗幼莖更加充實健壯。光太強時可遮陰，控制溫度在35℃以下。閉瓶鍛煉后開瓶鍛煉，除去封口膜，繼續鍛煉2～5d，使試管苗適應低濕環境。然后從瓶內取出經過鍛煉生根的試管苗，洗去根部的培養基，移栽于營養缽中(基質為田園土：腐熟發黑鋸末；河沙=1:2:1混合配制)，于溫度25℃的塑料大棚中培育。將營養缽小苗放在塑料大棚內加蓋有薄膜的小拱棚內，早晚各灑水1次，1～3d保持相對濕度在85％以上，基質水分不宜過多。1周后開始逐漸揭膜通風，直至完全除去薄膜。過渡移栽約30d，地上部分生長到10cm左右時可移至大田。
2024-5-25
2023-12-23
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